Журнал «Актуальная инфектология» 2 (3) 2014

Статья опубликована на с. 49-52

Кировская область расположена на северо-востоке европейской части России и относится к числу неблагополучных по развитию клещевых инфекций [4]. Большая часть территории области расположена в зоне южной и средней тайги и благоприятна для размножения и поддержания популяции клещей-переносчиков и животных — их прокормителей. Это сделало возможным циркуляцию на территории области возбудителей различных трансмиссивных инфекций. С конца прошлого века актуальной является проблема микст-инфицирования клещей [7]. Расширяется число известных микроорганизмов, которые может переносить иксодовый клещ, например Borrelia miyamotoi и Candidatus Neoehrlichia mikurensis [3, 8, 13]. Мониторинг инфицированности клещей является важнейшей частью профилактической работы, проводимой на региональном уровне.

Цель нашего исследования — изучение зараженности иксодовых клещей (Ixodes persulcatus) возбудителями различных заболеваний на территории эндемичного региона, которым является Кировская область.

Материалы и методы

В мае – июне 2010–2012 гг. в результате полевых экспедиций в различные районы Кировской области нами было собрано 322 особи Ixodes persulcatus обоих полов. Сбор клещей происходил в районах, которые относятся к подзоне южной тайги (Слободской, Кирово-Чепецкий, Зуевский, Оричевский, пригороды г. Кирова). Все клещи находились в имагинальной стадии развития, самки составили 46 %, самцы — 54 %. В 2010 году собрано 43 особи (13,4 %), в 2011 — 119 (37,0 %), в 2012 — 160 (49,6 %). Клещи собирались с использованием стандартной методики флагирования низкой растительности и лесной подстилки. Каждого клеща помещали в индивидуальную пробирку, замораживали при температуре –70 °С и транспортировали в лабораторию природно-очаговых инфекций ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора.

Материал исследовался на наличие ДНК/РНК вируса клещевого энцефалита (КЭ), Borrelia burgdorferi sensu lato, Borrelia miyamotoi, Anaplasma phagocytophilum, Ehrlichia muris/Ehrlichia сhaffeensis с использованием тест-системы «АмплиСенс TBEV, B.burgdorferi s.l., A.phagocytophilum, E.muris/E.сhaffeensis». Для положительных по вирусу клещевого энцефалита образцов определяли последовательность ПЦР-фрагментов, соответствующих фрагментам Е-гена, с последующим молекулярно-генетическим анализом.

Результаты и обсуждение

Из 322 исследованных иксодовых клещей 48,1 % оказались зараженными возбудителями каких-либо заболеваний (рис. 1). Колебания зараженности любыми микроорганизмами по годам следующие: 2010 год — 48,8 %, 2011-й — 53,8 %, 2012-й — 43,8 %.

Чаще других в клещах были выделены боррелии генокомплекса B.burgdorferi s.l. (45,3 %). В Европе количество клещей, зараженных B.burgdorferi s.l., может колебаться от 0,5 до 85 %. В США данный показатель может варьировать от 1 до 100 %. В природных очагах на территории России спонтанная инфицированность клещей составляет от 5 до 90 % [9]. Это в основном зависит от стадии развития клеща. Наименее инфицированными являются личинки клещей, наиболее — нимфы и имаго. В нашем исследовании все клещи находились на имагинальной стадии развития, поэтому полученные нами результаты сопоставимы с данными других исследователей. Например, в Московской, Вологодской, Ярославской, Свердловской, Новосибирской областях и Республике Удмуртия более 40 % клещей инфицированы патогенными боррелиями генокомплекса B.burgdorferi s.l. В Курганской и Кемеровской областях этот показатель превышает 60 % [8]. В отдельных районах Кировской области доля инфицированных клещей достигала значительных цифр. Например, в 2012 году в Зуевском районе зараженных клещей было 75,7 %. Таким образом, можно сделать вывод, что территория Кировской области является активным природным очагом иксодовых клещевых боррелиозов. Этот факт подтверждают показатели заболеваемости данной инфекцией в нашей области, которые в 2011–2012 гг. превысили среднероссийские показатели в 5 раз. Генотипирование боррелий в нашей работе не проводилось, но было выполнено ранее другими исследователями. По их данным, на территории Кировской области присутствуют три геновида боррелий: B.afzelii, B.garinii, B.bavariensis [6, 12].

В 2011 году нами впервые на территории Кировской области в клещах была обнаружена Borrelia miyamotoi. Данный микроорганизм, впервые выделенный из клещей рода I.persulcatus в Японии, является возбудителем возвратных лихорадок. Нами было выявлено 10 клещей, инфицированных B.miyamotoi, что составило 3,1 % от общего числа образцов. Это соотносится с результатами, полученными в других регионах России. В Ленинградской, Свердловской, Новосибирской, Иркутской областях, в Хабаровской крае и Республике Удмуртия генетический материал B.miyamotoi в иксодовых клещах встречается с частотой от 1,8 до 6,0 % [3, 8, 13].

Ehrlichia muris является возбудителем моноцитарного эрлихиоза человека. С помощью методики с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов полимеразной цепной реакции (ПЦР) для выявления ДНК и рРНК возбудителя удалось показать повсеместную распространенность данного патогена. Уровень инфицированности клещей этим микроорганизмом варьирует на территории России от 2 до 30 % [8, 11]. На территории Кировской области E.muris была выявлена в 12,4 % образцов клещей.

Вирус клещевого энцефалита был самой редкой находкой в нашем исследовании. Его удалось определить лишь у 4 клещей (1,2 %). По полученным результатам молекулярно-генетического анализа вирус клещевого энцефалита, выделенный из клещей, был отнесен к сибирскому генотипу и вошел в кластер с референсным штаммом «Заусаев». Метод ПЦР не является основным для определения вирусоформности клещей, собранных в природе. Повсеместно антиген вируса КЭ выявляют методом иммуноферментного анализа. При использовании этой методики среднемноголетний показатель вирусоформности клещей (с 2001 по 2012 год) на территории Кировской области составляет 15,7 ± 8,8 %[4].

В нашем исследовании в клещах не обнаружен A.phagocytophilum — возбудитель гранулоцитарного анаплазмоза человека. Этот результат является закономерным, так как данный микроорганизм чаще обнаруживается в клещах Ixodes ricinus [5], а в лесах Кировской области фоновым представителем является клещ рода I.persulcatus. Однако в соседних с нами регионах (Республика Коми, Пермский край, Республика Удмуртия) A.phagocytophilum все же выявляется (0,4–2 % случаев) [2, 8]. Это требует более пристального изучения данного микроорганизма в клещах в Кировской области.

В Кировской области нозоареалы возбудителей клещевого энцефалита и иксодового клещевого боррелиоза практически совпадают. Это обусловливает проблему микст-инфицирования клещей различными микроорганизмами, а также возможность развития одновременно двух и более нозологий у людей. Учитывая возможное наличие в клещах вируса клещевого энцефалита, боррелий различных геновидов, A.phagocytophilum и E.muris, в переносчике могут иметь место различные двойные и тройные комбинации возбудителей. В нашем исследовании 114 клещей (35,4 %) имели маркеры только одного конкретного патогена; 41 клещ (12,7 %) содержал возбудителей сразу нескольких заболеваний (рис. 1). Были выявлены 6 видов различных ассоциаций. Двойной микст был зарегистрирован у 36 клещей, тройной — у 5 (табл. 1).

В природе возможно одновременное инфицирование клеща двумя или тремя патогенами при кормлении на хозяине. Другой вариант — это получение одного возбудителя трансовариально, а следующих — при каждом кровососании клеща, находящегося на разных стадиях развития [7]. По данным литературы, микст-зараженность клещей является достаточно частым событием и регистрируется в 6,3–25,8 % случаев. Тройные миксты описываются как достаточно редкое явление, так как вероятность данного инфицирования у клеща мала [2, 5, 7, 11].

В нашем исследовании во всех микстах, включая сложные, присутствовал B.burgdorferi s.l. Это обусловлено высокой частотой встречаемости данного микроорганизма в популяции клещей. Вторым по распространенности был E.muris (80,5 % всех микстов). Необходимо отметить, что данный патоген крайне редко регистрировался в виде моноинфекции в клеще. Остальные комбинации были зарегистрированы в единичных случаях. Таким образом, проблема сочетанного инфицирования клещей чрезвычайно актуальна для практического здравоохранения. Э.И. Коренберг полагает, что любое заболевание, возникшее в результате присасывания клеща, следует рассматривать как потенциальную микст-инфекцию [14].

Уровень инфицированности самцов и самок клещей возбудителями трансмиссивных инфекций отличался. Из общего числа зараженных клещей (n = 155) самцы составили 56,1 %, а самки — 43,9 %. Среди самцов и самок клещей — носителей ассоциации возбудителей различия в степени их зараженности были незначительными (24 и 17 особей). То есть в европейской части России самцы и самки играют равную роль в сохранении и циркуляции вируса клещевого энцефалита и возбудителей бактериальных заболеваний. Самцы способны заражать самку при копуляции, а также при укусе самцом голодной самки. Этот путь назван А.Н. Алексеевым омовампирическим [1]. Население эндемичных регионов плохо осведомлено о роли самцов иксодовых клещей в эпидемическом процессе трансмиссивных инфекций. Учитывая непродолжительный характер присасывания самцов (несколько часов), человек может не заметить клеща и, в случае развития клинических симптомов, отвергнуть факт развития какой-либо клещевой инфекции. Поэтому врачам в регионах, неблагоприятных по развитию клещевого энцефалита и иксодовых клещевых боррелиозов, нужно очень тщательно собирать эпидемиологический анамнез, обращая внимание не только на сам факт присасывания клеща или наличие ползущего клеща, но и на пребывание человека в лесных массивах, скверах, на дачных участках.

Таким образом, Кировская область вследствие сложившихся ландшафтно-климатических условий является активным природным очагом трансмиссивных инфекций, которые передаются клещами Ixodes persulcatus. Достаточно часто в клеще содержится два или три возбудителя, которые в случае передачи их человеку способны вызвать микст-инфекцию. Поэтому необходимо продолжить мониторинг природных очагов в эндемичных регионах европейской части России с целью разработки более адекватных профилактических мер по борьбе с клещевыми инфекциями.

Выводы

1. Половина обследованных клещей (48,1 %) заражена микроорганизмами, преимущественно B.burgdorferi s.l. (45,3 %) и E.muris (12,4 %).

2. Актуальной является проблема микст-инфицирования. 12,7 % исследованных клещей содержат возбудителей сразу нескольких заболеваний.

3. Самцы иксодовых клещей играют важную роль в сохранении и циркуляции возбудителей различных заболеваний. Из общего числа инфицированных клещей самцы составили 56,1 %.