Газета «Новости медицины и фармации» 10(245) 2008

Желудочно-кишечный тракт — это сложная экологическая система, которая объединяет разнообразные по своим биологическим характеристикам биотопы. Понятие «нормальная микрофлора», характерное для данного биотопа, может быть отождествлено с эволюционно сформированным резидентным микробным пейзажем, находящимся в состоянии динамического равновесия с факторами внешней среды и микроорганизмом. Количественные и качественные колебания состава микрофлоры определяются индивидуальными анатомо-физиологическими особенностями ЖКТ, возрастом, характером питания, эпидемиологическими особенностями региона жизнедеятельности. Отклонения в состоянии равновесия, которые сопровождаются качественными и/или количественными изменениями состава микрофлоры определенного биотопа, обусловлены как эндогенными, так и экзогенными причинами, как правило, означают нарушение гомеостаза и нередко манифестируют клинически.

Целью нашего эксперимента было изучение іn vitro влияния культуры Saсcharomyces boulardii (S.b.) на размножение и жизнеспособность клинических штаммов микроорганизмов, выделенных из тощей кишки.

Энтерол 250 — препарат, содержащий лиофилизированные штаммы лечебных дрожжей — Saccharomyces boulardii, со следующими свойствами:

— антимикробное действие;

— антитоксическое действие за счет нейтрализации бактериальных цито- и энтеротоксинов;

— антисекреторное действие (уменьшение секреции воды и солей);

— повышение местной иммунной защиты за счет увеличения продуцирования IgA;

— трофический эффект по отношению к слизистой оболочке тонкой кишки вследствие освобождения спермина и спермидина.

Таким образом, Энтерол 250 оказывает не только биологически обусловленное восстановительное и защитное влияние на нормальную кишечную флору, но и выраженное этиопатогенетическое антидиарейное действие (Sazawal S. et al., 2006).

Выбор пробиотика базировался на результатах бактериологических исследований. Энтерол 250 (Saсcharomyces boulardii) проявляет антимикробную активность [2–4] по отношению к Pseudomonas aeruginosa, Clostridium difficile, Cl.рneumoniae, Cl.сlostridium pseudotropicalis, Clostridium krusei, Candida ablicans, Staphilococcus aureus, Proteus, Escherichia coli, Salmonella typhi (in vitro), Salmonella typhimurium, Salmonella enteritidis, Shigella dysenteriae (in vitro) , Shigella flexerni, Enthamoeba histolitica, Giardia lamblia. Кроме этого, Энтерол обладает генетической и естественной резистентностью к антибиотикам (Altwegg, 1992; Bergogne-Berezin, 1995). В связи с этим данный препарат показан для профилактики и лечения антибиотикассоциированного дисбиоза кишечника. Энтерол — единственный пробиотик, который изучался в двойных слепых плацебо-контролированных исследованиях (Roffe, 1996).

Материалы и методы

Лиофильно высушенная культура Saсcharomyces boulardii [1–3] предлагается для использования в комбинации с антибиотиками с целью профилактики синдрома избыточного роста бактерий в тонкой кишке.

Исследование включало:

1-й этап: отбор культур микроорганизмов (выбранные штаммы во временном промежутке до 24 ч доставлены в бактериологическую лабораторию для проведения количественного посева; полученные штаммы бактерий были полирезистентными к антибиотикам (причем все штаммы были резистентными к гентамицину и ампициллину), а количество микроорганизмов составило не меньше 5 ´ 10⁵). Выбранным критериям отвечали следующие штаммы: Candida ablicans, S.аureus, Ps.аeruginosa, E.coli, E.сlоасае, K.рnеumоnіае, C.koseri.

2-й этап: подготовка культур. Для эксперимента приготовлены 18-часовые культуры бактерий и грибов, выращенные на мясопептонном бульоне (МПБ); для культивирования грибов рода Candida к МПБ добавляли 1% раствор мальтозы; к 5 мл стерильного бульона добавляли содержимое одной колонии культуры, предварительно выращенной на мясопептонном агаре (МПА); грибы Candida культивировали на агаре Сабуро; культуру Saсcharomyces boulardii получали из препарата Энтерол 250 путем разведения в физиологическом растворе для получения соответствующей концентрации.

Антагонизм проверялся в следующих условиях эксперимента:

— Эксперимент № 1: исследуемые микроорганизмы (10 6 КОЕ/мл) вносили в стерильный физиологический раствор (равноценные условия для исследуемых культур), к которому добавляли культуру Saсcharomyces boulardii для получения концентрации 5 ´ 10⁶.

— Эксперимент № 2: исследуемые микроорганизмы (10 2 КОЕ/мл) вносили в стерильный МПБ, к которому добавляли Saсcharomyces boulardii для получения конечной концентрации 5 ´ 10⁶.

— Эксперимент № 3, 4: исследуемые микроорганизмы (10² КОЕ/мл) вносили в стерильный МПБ с гентамицином (опыт № 3) и ампициллином (опыт № 4), к которому добавляли Saсcharomyces boulardii для получения конечной концентрации 5 ´ 10⁶.

Для контроля использовали пробирку с культурой исследуемых микроорганизмов без Saсcharomyces boulardii.

Последующие 3–5-й этапы были общими для всех экспериментов:

— 3-й этап — проводили количественный посев на селективные среды;

— 4-й этап — смесь инкубировали в термостате в течение 24 часов;

— 5-й этап — проводили количественный посев на селективные среды.

В качестве селективной среды для Candida ablicans использовали агар Сабуро, для S.аurеus — желто-солевой агар, для энтеробактерий (E.coli, E.сlоасае, K.рnеumоnіaе и C.koseri) — агар Эндо, для псевдомонад Ps.aеruginosa — МПА с нистатином для угнетения роста Saсcharomyces boulardii.

На среды засевали разные разведения и подсчитывали колонии. С целью достоверности проведенных исследований опыты проводили трижды.

Результаты исследования, полученные при проведении эксперимента, отображены в табл. 1, 2. Они свидетельствуют о том, что антагонизм Saсcharomyces boulardii наиболее выражен в физиологическом растворе (без питательной среды для исследуемых бактерий). Применение Saсcharomyces boulardii с антибиотиками подтвердило синергичное антагонистическое действие Saсcharomyces boulardii, что свидетельствует о целесообразности их применения в комбинированной антибактериальной терапии, направленной на снижение микробного обсеменения тонкого кишечника. Наиболее выраженное антагонистическое действие Saсcharomyces boulardii обнаруживалось относительно S.аureus, Ps.аеruginosa и E.coli, которые являются важными агентами в развитии инфекционных осложнений и диарейного синдрома (в том числе и эндогенного происхождения).

Выводы

1. Комбинированное применение антибактериальных препаратов и Sассhаrоmусеs boulardii (Энтерол 250) обеспечивает подтвержденное іn vitro, достоверное снижение микробного числа полирезистентных микроорганизмов, выделенных из тонкой кишки.

2. Использование медикаментозной терапии с включением в комплекс лечения Saсcharomyces boulardii (Энтерол 250) позволит достичь желательного клинического эффекта — профилактики синдрома избыточного роста бактерий в тонкой кишке.

Практична медицина. — 2006. —Т. 12, № 5. — С. 89-93.